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液相色谱柱日常使用和维护保养

发布时间:2017-06-07 10:14:41 | 点击:0
液相色谱柱日常使用和维护保养 液相色谱柱日常使用和维护保养 液相色谱柱平常使用和保护保养色谱柱的正确使用和保护10分重要,稍有不慎就会下降柱效、缩短使用寿命乃至破坏。在色谱操作进程中,需要注意以下问题,以保护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状态;柱压的突然升高或下降也会冲动柱内填料,因此在调理流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。② 应逐步改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变成全部是水,反之亦然。③ 1般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速下降柱效。④ 选择使用适合的活动相(特别是pH),以免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接1预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可以使活动相在进入分析柱之前预先

液相色谱柱平常使用和保护保养
色谱柱的正确使用和保护10分重要,稍有不慎就会下降柱效、缩短使用寿命乃至破坏。在色谱操作进程中,需要恒温恒湿试验箱冷热冲击试验机注意以下问题,以保护色谱柱。
① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变金属导管弯曲试验机化或使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状态;柱压的突然升高或板材抗折试验机下降也会冲动柱内填料,因此在调理流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的温度循环冷热冲击试验机转动不能过缓(如前所述)。
② 应逐步改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接y52缓冲材料冲击试验机从有机溶剂改变成全部是水,反之亦然。
③ 1般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲动态轨枕试验机除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速下降柱效。
④ 选择使用适合的活动相(特别是pH),以免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接1预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可以使活动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤ 避免将基质复杂的样品特别是生物样品直紫外加速老化试验机接注入柱内,需要对样品进行预处理或在进样器和色谱柱之间连接1保护柱。保护柱1般是填有类似固定相的短柱。保护柱可以而且应当常常更换。
⑥ 常常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保存在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中活动相的置换应以相混溶的溶剂逐步过渡,每种活动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
下面罗列1些色谱柱的清洗溶WAWwww.1495.com剂及顺序,作为参考:硅胶柱以正已烷(或庚烷)、2氯甲烷和甲醇顺次冲洗,然后再以相反顺序顺次冲洗,所有溶剂都必须严格脱水。甲微机控制弹簧疲劳试验机醇能洗去残留的强极性杂质,已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇柴油润滑性试验机、乙腈、1氯甲烷(或waw1000b电液伺服试验机氯fang)顺次冲洗,再以相反顺序插拔力试验机顺次冲洗。如果下1步分析用的活动相不含缓冲液,那末可以省略最后用水阀门试验台试验机冲洗这1步。1氯甲烷能洗去残留的非极性杂质,在甲醇(乙腈)冲洗时重复注射100~200µl4氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。4氢呋mm2000型摩擦磨损试验机喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射2甲亚砜数六组摇摆试验机次。另外,用乙腈、丙酮和3氟醋酸(0.1%)梯压力容器MPV20型屏显式PV摩擦磨损试验机水压试验机度洗脱能除去蛋开关寿命疲劳试验机MME2屏显式材料磨损试验机白质污染。
阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、甲醇、2氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有机物)、甲醇、水顺安全鞋试验机次冲洗。
⑦ 保存色谱柱时应将柱6hz弹簧疲劳试验机内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,避免溶剂挥发干燥。绝对制止将缓冲溶液留在柱内静置过锚杆抗拉力试验机晚上或油墨印刷脱色试验机更长时间。
⑧ 色谱柱使用进程中,如果压力升高,1种多是烧结滤片被梗塞,这时候应更换滤片或将其取出进行清洗;另外一种多是大份子进包装材料拉力试验机入柱内,使柱头被污染;如果柱效下降或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。
在后两种情况产生时,谨熔深试验机慎拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱,压平,再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改良,但是很难恢复到新柱的水平。
柱子失效通常是柱端部份,在分析柱前装1根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保护、延长柱寿命的作用。采取保护柱会损钢球跌落试验机失1定的柱效,这是值得的。
通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。柱子使用1段时间后,可能有1些吸附作用强的物资保存于柱顶,特别是1些有色物资更容易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用1段时间后柱顶填料可能塌陷,使柱效降落,这时候也可补加填料使柱效恢复。
每次工作完后,最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采取盐缓冲溶液作活动相时,使用完后利用无盐活动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、溴)的6odf试验机化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长时间与之接触。装在HPLC仪上柱子如不常常使用,应每隔4~5天开机冲洗15分钟。
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